In den letzten 10 Jahren sind einige neue molekularbiologische Techniken in der medizinischen Diagnostik eingeführt worden. Die wichtigsten Neuerungen in der medizinischen Diagnostik betreffen die Untersuchung von DNA- und RNA-Molekülen.
Bestimmte Nukleinsäuresequenzen sind als Indikatoren für Krankheiten deshalb besonders geeignet, weil Nukleinsäuren leicht zugänglich und leicht zu isolieren sind. Es gibt verschiedene neue molekulardiagnostische Techniken, mit denen die Anwesenheit oder Abwesenheit oder auch die Menge bestimmter Nukleinsäuremoleküle untersucht wird. Diese Techniken zeichnen sich durch drei wichtige Eigenschaften aus: Spezifität, extrem niedrige Nachweisgrenze, Schnelligkeit. Mit den Techniken der molekularen Diagnostik werden zur Zeit vor allem Infektionen, Erbkrankheiten, Tumore, Prädispositionen und pharmakogenetische Eigenschaften untersucht.
In diesem Laborkurs erhalten die Teilnehmer einen Überblick über die wichtigsten molekularbiologischen Grundlagen und über die wichtigsten Techniken der molekularen Diagnostik, die heute in medizinischen Labors benutzt werden.
Die folgenden Techniken werden besprochen und zum Teil im eigenen Experiment angewandt:
- Isolierung von DNA und RNA aus Vollblut oder anderen Zellen
- Polymerasekettenreaktion (PCR), quantitative PCR, reverse Transkription-PCR (RT-PCR), “nested” PCR
- Nach der PCR: Gelelektrophorese, allelspezifische Hybridisierung, Fragmentanalyse (Applied Biosystems)
- DNA-Sequenzierung (Sanger-Technik, 454-Technik und andere second generation sequencing Techniken)
- “Real Time” PCR (LightCycler und TaqMan)
- DNA-Chips
