Die Molekularbiologie und die Gentechnik in Theorie und Praxis bilden heute eine sehr wichtige Grundlage für die Arbeit im biologischen oder medizinischen Labor. In den letzten Jahren wird der Bedeutung der Molekularbiologie und der Gentechnik für unser tägliches Leben immer wichtiger. Die meisten Anwendungen der Molekularbiologie sehen wir in der Medizin.
In diesem fünftägigen Laborkurs für Anfänger werden die wichtigsten Fakten der Molekularbiologie vermittelt und einige Methoden der Molekularbiologie im Labor durchgeführt.
Inhaltsangabe in Stichpunkten:
Grundlagen:
- DNA / RNA / Proteine
- Replikation / Transkription / Translation
- Gene und Genome, Mutation, Rekombination, Kartierung
- Gentechnik: Gen-Isolierung, Sequenzierung, Polymerasekettenreaktion (PCR), DNA-Transfer, gentechnisch veränderte Organismen (GVO), Anwendungen der Gentechnik
Praktischer Teil des Kurses:
- Isolierung von Plasmid-DNA aus Bakterien, DNA-Spaltung durch Restriktionsendonukleasen, Agarose-Gelelektrophorese, DNA-Extraktion aus dem Gel, Ligation, Transformation von E. coli mit Plasmiden, Identifikation von rekombinanten Klonen, Durchführung einer PCR, Herstellung und Reinigung eines rekombinanten Fusionsproteins aus E. coli, SDS-Polyacrylamidgelelektrophorese und Western-Blot.
Im theoretischen Teil werden alle Methoden ausführlich besprochen. Zusätzlich wird auf folgende Punkte eingegangen: Enzyme für die Molekularbiologie: Restriktionsendonukleasen, DNA-Ligasen, Polymerasen und andere DNA-modifizierende Enzyme. Plasmide und Bakterienphagen als Vektoren für E. coli, Bakterien und eukaryotische Zellen als Empfänger von rekombinanter DNA, Klonierungsstrategien und Genidentifikationsmethoden, Hybridisierungsformate, Transkription und Translation bei Pro- und Eukaryonten, Kontrolle der Transkription durch Promotoren und DNA-bindende Proteine, Expressionsvektoren und heterologe Genausprägung.
