In diesem Immunhistochemie-Grundkurs werden alle wichtigen Techniken vermittelt, die für den Antigennachweis in Diagnostik und Forschung eingesetzt werden können.
Im theoretischen Teil werden folgende Punkte dargestellt:
- Antikörper: Aufbau, mono- und polyklonale Antikörper, Aszites, Fab-Fragmente
- Immunhistochemische Techniken: indirekte Peroxidase-, PAP-, APAAP-, ABC-Technik
- Gewebe-Aufarbeitung: Fixierung, Einbettung, Lagerung
- Gewebe-Vorbehandlung: Reduzierung des Hintergrunds, Antigen-Demaskierung
- Nachweis-Methoden: Fluoreszenz, enzymatische Färbereaktion, Autoradiographie
- Versuchsplanung: Wahl der Antikörper-Verdünnung, der Methode, der Nachweis-Methode
- Kolokalisationsmöglichkeiten
Der Praxisteil setzt sich aus zwei Versuchen zusammen: An histologischen Präparaten (Paraffinschnitte) werden von den Kursteilnehmern das Zytoskelettprotein GFAP und das Kernprotein NeuN mit Hilfe der indirekten Peroxidase-Technik (Zweistufentechnik) und der ABC-Methode (Dreistufentechnik) im Rattengehirn dargestellt. Die Präparate werden anschließend gemeinsam mikroskopiert und die Vor- und Nachteile der beiden Methoden vergleichend analysiert. Das Kursprogramm enthält auch ausführliche Troubleshooting-Hinweise.
